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仪器设备

高效液相色谱仪

适宜于分离高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质。在本学科主要用于造纸植物组分的分离和分析。广泛应用于生物、食品、化工、环境等学科。

仪器编号:93296300 购置日期:1993
放置地点:新实验楼五楼 502 管  理 人:伍红
仪器型号:Waters 600E产      地:美国
仪器功能:高效液相色谱仪的系统由泵、进样器、色谱柱、检测器等几个部分组成。流动相通过高压泵进入系统,样品溶解经进样器进入流动相而载入色谱柱内。样品中的各组分在两相间具有不同的分配系数,经过反复多次的吸附—解析的分配过程,混合物被分离成单个组分依次从色谱柱流出,通过检测器检测浓度信号。
应用:高效液相色谱适宜于分离高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质。在本学科主要用于造纸植物组分的分离和分析。广泛应用于生物、食品、化工、环境等学科。

流速范围:0.001~10.0mL/min
压力范围:0-3000psi

操作规程:
一、操作前溶剂和样品处理

根据待测样品的性质和所用的色谱柱性质选择适当的溶剂作流动相。流动相要求纯度高(A,R以上,最好再经过滤及蒸馏处理)不能含有卤离子或能产生卤离子的溶剂。溶剂使用前进行超声波脱气。样品配成澄清溶液,溶剂的性质必须符合色谱柱的要求,不能有或在分析过程中产生颗粒或混浊。
二、清洗泵和流路
为保证分析结果的正确,泵和流路必须无气泡和异物。清洗泵和A、B、C、D管道操作如下:
1.在600E控制器屏幕上操作,按IS0.CRATIC在此屏幕上设制操作条件。
2.在溶剂A%中设制为100。
3.U6K中INJECT/LOAD扳置INJECT位置,阀扳手于垂直位置。
4.设流速为10.0ml/min,冲洗A管几分钟,如果空气量多,则用注射器抽取,直至无脉冲为止。用烧杯接流出的溶剂,减小流速冲洗,如1ml/min,冲洗流速从大到小设定。分别设定B%、C%、D%各100,对B、C、D管重复以上操作进行清洗。
5.泵和管清洗后,连接色谱柱,用分析流速(如1.0ml/min)平衡柱子,流出液用溶剂瓶接收。
三、分析条件的选择
此操作在600E上进行。
1.采用等比溶剂输出方法。
按IS0 CRATIC键,在出现的屏幕上设制流速及溶剂的组成。
2.采用梯度溶剂输送方法。
(1)按PROG.GRADIENT键,在屏幕上编辑梯度表并存表。
①按OPER.GRADIENT键,在此屏幕上执行梯度表上程序,选择梯度表参数和溶剂的组成。
四、检测器的选择参数设置  
根据需要选用检测器,并在仪器背侧将积分仪信号接收线和检测器信号输出端相连。
1.紫外检测器操作:在板面上设制各参数,如设制波长值为230nm,按λ230←即在屏幕上显示。其它参数设制方法相同。
2.示差检测器操作:在板面上设制各参数。
五、进样
1.人工进样
将INJECT/LOAD扳于LOAD位置,阀扳到垂直方向,取下进样口塞子.用微量注射器注入一定量样品。置回塞子,阀扳回水平位置,将INJECT/LOAD扳回INJECT即开始分析。各组分的色谱峰全部流出后,基线干稳,即按END A键辛丁印结果。
2.自动进样
将样品容量瓶置于转动盘的编号槽内,单一样品瓶用State Page状态,在屏幕显示下按键。多个样品瓶用Aueo.Page状态设置样品参数、注射量及时间等。
六、分析结束
待测样品的色谱峰全部流出后,基线平稳,连续用溶剂流动一段时间,即可结束分析。设流动相流速为0ml/min,按STOP FLOW,关各仪器上的电动开关、分电源和总电源。
注意事项:所有流动相及样品需经0.22µm过滤膜过滤。