仪器编号:06001513 | 购置日期:2006 |
放置地点:新实验楼 五楼 502 | 管 理 人:伍红 |
仪器型号:WD-9413B | 产 地:中国 |
仪器功能:胶成像即对dna/rna/蛋白质等凝胶电泳不同染色(如eb、考马氏亮蓝、银染、sybr green)及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析。凝胶成像系统可以应用于分子量计算,密度扫描,密度定量, PCR定量等生物工程常规研究。反射紫外光源波长:254nm、365nm
透射紫外光源波长:302nm
紫外光透射面积:200×200mm
可见光透射面积:250×220mm
操作规程:
1、打开电脑。
2、选择并打开程序。
3、点击凝胶成像分析仪(Gel-Pro Analyzer),进入主界面。打开主程序后,按以下步骤进行:
(1) 点文件主菜单;
(2) 从选项中选择实验选项;
(3) 打开一个已存档的实验。
4、载入实验图像数据。
首先载入存储数据,从菜单选项中选择打开,数据图表会在仪器工作界面显示。可以进行数字图像对比度,微克,亮度的修改,通过凝胶成像分析仪,可以提高图像达到你想突出某个特征和淡化其他某些特征。
这个工具能调节图像的像素以达到最高的清晰度。当你选择了最佳的对比度,凝胶成像分析仪就会自动调节对比度、亮度、灰度控制器达到最优设置。
在编辑菜单中的反转对比度命令是用来重置图像像素,图像将会以相反的强度显示,比如,灰度将会以黑度显示,黑度也将以灰度显示。
菜单中对比度复位命令使图像回到它原始设置的像素值显示。
5、修正图像背景。
工具菜单中的背景修正命令能用来生成一个平滑的背景,还能补偿不均匀的亮度、不均匀的摄像机响应以及微小的异物(比如显微镜镜片上的灰尘会损坏图像的背景)。要使用背景修正命令,必须能够单独捕捉背景的图像。捕捉背景的图像时,可以将载玻片从操作台移开,或者用全光学散焦。当图像减去背景图像后,与背景同等面积的区域将会被接近背景平均强度值替换。
按以下步骤,使用背景修正命令:
(1) 打开要修正或除去背景的图像;
(2) 打开背景图像(单独的背景图像),确保当前选中的图像是要操作的图像。
(3) 从工具菜单中选择背景修正命令。背景修正对话框弹出。
(4) 选择背景修正方法:背景校正或背景扣除。
背景扣除用于所有图像,除去那些用来测量光密度的透射光实验。这个选项容易使对象达到清晰度和分离度。为了达到要求的光密度,可以用背景修正选项。背景修正说明光密度不是灰度的线性函数。如果选择背景校正方法,黑色电平旋转盒就被激活。这个盒子已经了包含强度校准装置分配给图像黑色电平值。当超过这个值,就出现误差。
(5) 从背景图像下拉的列表框,选择背景图像。(如果工作区只有其他的图像打开,它将会被默认选中)
(6) 选择要校正/除去背景的图像。
(7) 点击 OK。
6、展平图像背景(仅用于菌落计算)。
如果用菌落计算工具,它的展平背景装置能使相同强度背景与要计算的菌落一样平滑。这个强度的背景很难与要计算的菌落分离开来。按以下步骤,展平一张图像的背景:
(1) 确保要处理的图像在凝胶成像分析仪工作站中打开。
(2) 打开菌落计算窗口,从图像菜单中选择展平背景选项。
(3) 选择符合图像背景的选项。如果样品是明亮的,在黑暗的背景中,则选择黑暗;如果样品在黑暗中,背景更明亮,则选择明亮。
(4) 最大值。形体尺寸旋转盒,输入与图像或AOI中最大菌落相似的直径(像素)。这个值用来平展背景使菌落与背景区分开。
选择最大的形体值,最好估算大些而不是小些。选择一个太大的值将会增加处理时间,但是不会影响图像。选择太小的值可能产生有误的结果。