仪器编号：08707184	购置日期：2008
放置地点：新实验楼 五楼 502	管  理 人：伍红
仪器型号：AKTA.Purifier Uqc10	产      地：瑞典

仪器功能：可以进行生物大分子的纯化，已知和未知蛋白质的纯化，药物蛋白的分离，蛋白质的定性等。

流量范围：0.01-100ml/min
压力范围：0-10MPa
波长范围：254um 280um
电导检测：1-999.9us/cm

操作规程：
一、 开机
打开仪器的主电源，打开电脑电源。待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮并不闪烁），双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
二、准备工作溶液和样品
所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。
三、 清洗及管道及装柱
首先将A1管道放入平衡液或banding buffering中，将B1管道放入高盐溶液中或elution buffering中，在system control窗口点击manual→pump→pump wash basic，选中A1，B1管道为ON， execute。泵清洗程序会自动运行结束。
选择manual→pump→flow rate，输入流速1ml/ml，insert；选择manual→Alarm&mon→alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。将进样阀的1号位管道接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉，直接拧入紫外流动池或连接管道。
四、开始纯化
1、平衡  柱子平衡好了（观察电导COND，pH的数值正确曲线走稳了）。此时将紫外调零，选择manual→Alarm&mon→autozero，exectue，就准备上样了。
2、上样  用样品环上，将样品吸进注射器，推掉气泡，从进样阀的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍），不要取下注射器。选择manual→flowpath→injectionValve→inject，execute。用泵上样：点击pause，将A1放入样品中，点击countine；待样品上完后，再将A1放入到平衡液中继续清洗柱子。
3、洗脱  用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。选择manual→pump→gradient，按照自己的条件选择target％B（例如100％）和length（例如20min），execute。
4、收集  选择manual→Frac→fractionation_900，输入每管收集体积，exectue。结束固定体积收集选择Frac→fractionation_stop_900，exectue。
五、清洗系统及拆柱
将A1和B1入口放入纯水中，启动pump wash purifier功能冲洗A泵和B泵及整个管路。然后再将A1和B1入口放入20％乙醇中，同样操作将乙醇冲满整个管路保存。系统给柱子一个慢流速，设置系统保护压力，然后先拆柱子的下端，拧上堵头，再拆柱子的上端，拧上堵头。
六、关机
从软件控制系统的第一个窗口unicorn manager点击退出，其他窗口不能单独关闭。然后关闭AKTA主机电源，关闭电脑电源。